白血病多药耐药机理的研究进展

 

6   与细胞生活环境变化的关系

6．1   与pH值的关系

    Hamilton等通过结肠癌细胞株研究了MDR逆转剂与细胞内pH值的关系，在加入逆转剂的同时加入含碳酸氢盐／CO2的林格氏缓冲液，使细胞内pH值逐渐降低（0．1～0．3units），发现细胞内酸化可以加强细胞的化学敏感性，特别在碱性的细胞外环境下，有助于减少MDR修饰因子的效应，同样有助于P-糖蛋白阴性细胞的化学敏感性的提高（23）。Miller等在研究正定霉素在克鲤鱼的近端肾小管的分泌情况时，发现pH为8．25时，细胞内正定霉素的聚集不受环孢素A的影响，当pH为7．25时，药物在细胞内的聚集被环孢素A所增加，其机制可能是pH为8．25时药物通过简单扩散穿过管侧膜，并由MDR传输蛋白分泌入管腔，而pH为7．25时，除扩散外，还有有机阳离子载体介导的重吸收，故而分泌减少，细胞内含量增加（24）。现在已知P-糖蛋白的ATP酶活性的最适pH是7．5。

 

6．2 温度的关系

    P-糖蛋白有药物刺激性ATP酶活性，其作用位点对核苷酸有低亲和力和低特异性，Vrbatsch等从富含P-糖蛋白的中国仓鼠卵巢浆膜中发现钒酸盐可诱导俘获核苷酸，可稳定抑制P-糖蛋白的合成，而若恢复P-糖蛋白的活性，37℃时需84min，4℃时超过30h（25），说明ATP酶的恢复与俘获的核苷酸的释放和温度有关。

 

加温能使细胞膜流动性增加，稳定性下降，通透性增加，提高化疗药物的渗透和吸收；温度升高，不仅加快了药物的摄取和药物反应速度，而且可减少DNA断裂的修复，加温还使镶嵌在膜脂双层中的抗原流动性增加，并可聚积在液化细胞膜表面，有利于抗体和补体的结合，发挥免疫功能，体外实验证明，42℃2h可使化疗药物的抗癌作用增强10～100倍，43℃联合AT1258的毒性作用是2者单独作用乘积的218倍，目前高温逆转肿瘤耐药的现象和机理已受到重视（26）。与热疗相对应，有人通过研究小鼠乳腺癌细胞生长的冷敏感性时发现，小鼠乳腺癌FM3A细胞在低温下（33℃）生长放慢，并且TopoⅡ-α的表达也降低（27）。

 

6．3    基质及营养条件的影响

    Lorico等在研究小鼠淋巴细胞株WEHI-3B／NOVO对新生霉素和鬼臼乙叉甙的交叉耐药性时，在培养基中加入能量代谢抑制剂叠氮化物和脱氧葡萄糖时，鬼臼乙叉甙的排除明显受抑制，当重新加入葡萄糖时又恢复了原来的排除率（28），这说明营养条件对耐药性有很大影响。

    John等将成年大鼠肝癌细胞分别培养于Ⅰ型胶原、基底膜凝胶、IV型胶原和层粘蛋白上，然后观察其对化疗药的耐药性，结果表明，细胞外基质对肝细胞的耐药性具有调节作用，I型胶原能使P-糖蛋白mRNA表达增加，而基底膜凝胶对其表达无显著影响，IV型胶原和层粘蛋白可降低其表达水平（29）。

 

6．4  氧浓度的影响

    高氧浓度可激活超氧化物歧化酶，降解自由基，减轻药物的细胞毒作用，如肺部肿瘤由于局部氧浓度高，对阿霉素不敏感，而皮下组织肿瘤由于相对乏氧，则可对阿霉素敏感。Lene-han等曾研究了人MDR淋巴细胞（HL-60／AR）及其亲代敏感细胞（HL-60），证明HL-60／AR细胞MDR过度表达，抗氧化剂能力较HL-60增强10倍，抗氧化剂功能增强可以说明其耐某些有氧化作用的药物（如正定霉素）的情况（30）。

    细胞生活环境因素对MDR的影响非常复杂，也很重要，且常在研究中被忽视，因此有人提出变细胞耐药性的提法为组织耐药性（31），以增强研究者的整体观念，并适应人体内生物环境变化的多样性，这方面还有待进一步研究。

    总之，肿瘤耐药机制是个非常复杂的问题，由于一些条件和认识水平的限制，还有很多问题没有解决。例如不同肿瘤可能有不同的耐药机理，同一肿瘤在不同的条件下耐药机理也可能不同，多种耐药机制中哪种是主要的，哪种是次要的，相互间的关系如何等，另外，目前还没有统一的MDR判定标准和检测方法。但尽管如此，肿瘤耐药性的研究无疑使人们对肿瘤的认识又前进了一步，并使肿瘤的治疗呈现出良好的前景。

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